分子雜交箱又稱分子雜交爐、分子雜交儀,是采用核酸分子雜交技術(shù)檢測待測基因組中是否含有已知基因序列的設(shè)備。廣泛地使用于克隆基因的篩選、酶切圖譜的制作、基因組中特定基因序列的檢測和遺傳病的基因診斷等方面。下面隨小編去了解下分子雜交箱。 一、分子雜交箱原理
核酸分子雜交技術(shù)根據(jù)堿基互補配對原則,在一定條件下用標記的已知DNA或RNA的片段(探針)來檢測樣本中是否有待測的核酸序列。
生理條件下DNA呈穩(wěn)定的雙鏈螺旋結(jié)構(gòu),在體外,當有變性因素存在時,DNA分子內(nèi)部的氫鍵斷裂,解離成兩條單鏈DNA,這種現(xiàn)象稱為變性。在除去變性因素后,單鏈DNA能通過堿基互補再結(jié)合成穩(wěn)定的雙鏈螺旋結(jié)構(gòu),此過程稱為復(fù)性或退火。
在復(fù)性過程中,若存有與樣本核酸某部分序列相同或高度同源的外源性單鏈DNA的片段或寡核苷酸(一般為17~45個堿基)時,兩者可通過互補堿基形成雜交體,即雙鏈DNA分子,這一過程稱為雜交。用一段已知的DNA的片段加入復(fù)性的DNA中,若能夠結(jié)合成雙鏈分子,說明樣本中含有已知的DNA序列。
核酸分子雜交不僅發(fā)生在DNA與DNA之間,也可發(fā)生在RNA與RNA、RNA與DNA之間。生成的雜交體分別為DNA-DNA、RNA-RNA或RNA-DNA的雙鏈結(jié)構(gòu)。
二、分子雜交箱特點
1.分子雜交儀是現(xiàn)代實驗室采用雜交技術(shù)的理想設(shè)備,可替代塑料雜交袋和水浴搖床,并避免雜交袋破損帶來污染危險。
2.雜交爐具有微機控溫精確,爐內(nèi)空氣循環(huán)裝置設(shè)計*,升溫速度快等特點。
3.采用微電腦智能控制,液晶顯示三種功能(溫度顯示、瓶架旋轉(zhuǎn)速度、托盤擺動速度)。
4.具有存儲記憶功能,可以直觀顯示系統(tǒng)的運行狀況。
5.溫度控制采用數(shù)字PID技術(shù),輸岀采用PWM方式,控溫精度高,穩(wěn)定性好,并設(shè)有超溫保護裝置。
6.可以同時顯示箱內(nèi)控溫溫度、滾動式瓶架旋轉(zhuǎn)速度、酶標板或試劑托盤的擺動速度。
7.在設(shè)定范圍內(nèi)可隨意調(diào)節(jié)所需要的控溫溫度、瓶架旋轉(zhuǎn)速度、搖床擺動速度。